7-30
剛復(fù)蘇的細(xì)胞狀態(tài)不好,有許多死細(xì)胞,頻繁換液好嗎?大致如題,有一些人認(rèn)為細(xì)胞剛復(fù)蘇不能狗頻繁的換液,說是細(xì)胞會(huì)自己分泌細(xì)胞因子維持自己的生存,換液的話,就會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng),長(zhǎng)的不好,但是我的細(xì)胞狀態(tài)不好而且有很多細(xì)胞碎片,細(xì)胞死亡之后在培養(yǎng)基中會(huì)不會(huì)釋放很多的有毒物質(zhì),對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)不利,所以就想要換液把死細(xì)胞和細(xì)胞碎片都洗掉,目前不知道怎么選擇,所以想請(qǐng)大家給一下就參考意見?能洗掉的就洗,洗不掉的也不用刻意的用力吹,正如你所說的細(xì)胞密度小,可能會(huì)損害細(xì)胞。換液的話還是2~3天...
7-24
基礎(chǔ)篇-無菌操作基本技術(shù)1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無菌室及無菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作。2.無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物...
7-18
近看到不少問有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)污染的事,正好我看到了一個(gè)有關(guān)這方面的總結(jié),很全很好很強(qiáng)大,跟大家分享下細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結(jié)如下:常見的污染如下:1、細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠,壓力足夠!尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液...
7-18
生物刺激素肯定不是所謂的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑也就是俗稱的激素,是指人們根據(jù)植物內(nèi)源激素的原理和功能進(jìn)行人工合成的化學(xué)物質(zhì),當(dāng)然不排除有個(gè)別企業(yè)也添加植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。而真正意義上的生物刺激素主要是天然物質(zhì)經(jīng)過提取或是分解得到的產(chǎn)物,對(duì)植物具有生理活性的物質(zhì),甚至有些可以直接刺激植物內(nèi)源激素的形成,主要的種類有腐植酸、氨基酸、微生物、甲殼素類、海藻提取物以及其他的一些植物提取物,其中應(yīng)用廣泛的是氨基酸、腐植酸、海藻提取物這三類。很多壇友會(huì)奇怪,氨基酸、腐植酸、海藻提取物...
7-16
1、熒光免疫測(cè)定技術(shù)的概念:將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記,試劑與標(biāo)本中相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后,測(cè)定復(fù)合物中的熒光素,這種免疫技術(shù),稱為免疫熒光素技術(shù)。2、熒光的產(chǎn)生:物質(zhì)吸收外界能量而進(jìn)入激發(fā)狀態(tài),在回復(fù)基態(tài)時(shí)多余的能量以電磁輻射的形式釋放,即發(fā)光,這種光稱為熒光。這種物質(zhì),稱為熒光素。由光激發(fā)所引起的熒光,為光致熒光------熒光免疫技術(shù)由化學(xué)反應(yīng)所引起的熒光,為化學(xué)熒光------化學(xué)發(fā)光技術(shù)3、熒光素的熒光特性:⑴停止供能,熒光現(xiàn)象隨即終止⑵對(duì)光的吸收和熒光的...
7-16
一般我們購(gòu)買商品化的primaryantibody的時(shí)候,抗體的說明書中都會(huì)給我們一個(gè)推薦的抗體使用濃度。這個(gè)濃度在一定程度上來說,是過飽和的,可以滿足大多數(shù)實(shí)驗(yàn)的染色需求。但是因?yàn)槭沁^飽和的濃度,這就帶來了一定程度的抗體浪費(fèi)。而過量的抗體,也會(huì)大大提高樣本的自發(fā)熒光。從另一個(gè)角度來看,因?yàn)閺S家給出的推薦濃度都是基于一個(gè)特定的樣本濃度和樣本體積,所以在一些特殊的實(shí)驗(yàn)中,比如樣本濃度或樣本體積過大的實(shí)驗(yàn),推薦的濃度就無法達(dá)到飽和滴加的要求。在這樣的前提下,推薦實(shí)驗(yàn)用戶針對(duì)自己的...
7-10
1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無菌室及無菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作。2.無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取...
7-5
MEM細(xì)胞培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室里常見和基本的實(shí)驗(yàn)了,但卻不是簡(jiǎn)單的。別小看細(xì)胞培養(yǎng),這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問。有時(shí)候細(xì)胞狀態(tài)不好,轉(zhuǎn)染、藥篩這些實(shí)驗(yàn)根本就沒辦法做。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多,讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Invitrogen(GIBCO)、ThermoFisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)...
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